中国农业科学院特产研究所在动物病毒快速诊
首先，要对王凤雪副研究员及所有中国病毒学论坛的会员说一声sorry，此文之前报道时文章信息有些错误，小编代表论坛对大家表示深深的歉意。文章已进行修正，重新报道，请大家见谅！！！
导读：中国农业科学院特产研究所“特种动物病原与免疫科技创新团队”王凤雪副研究员在动物病毒快速诊断方法研究中取得了突破进展，提出利用交叉引物扩增（Cross-PrimingAmplification）方法检测动物病毒性传染病，该种检测方法快速、灵敏且摆脱了试验仪器和条件的束缚，可以直接用于现场检测。该研究题目为“ReverseTranscriptionCross-PrimingAmplification-NucleicAcidTestStripforRapidDetectionofPorcineEpidemicDiarrheaVirus”，成果发表在Nature出版集团旗下刊物ScientificReports。
上图为CPA方法不同成分和反应条件的优化和电泳结果对比:(a)外引物,(b)探针,(c)交叉引物,(d)dNTP,(e)MgSO4,(f)甜菜碱,(g)BstDNA聚合酶,(h)反应60?分钟,(i)反应75分钟,(j)反应90分钟,(k)凝胶电泳复核试纸条检测的CPA结果.
该研究成果在农业科研创新工程和科研横向联合项目的支持下，对危害我国规模化养殖中的重大病毒性传染病新型快速的诊断方法进行了深入研究。研究报告以国内外近年来危害养猪业较为严重的猪流行性腹泻为突破口，该病是一种高度接触性消化道传染病，以发病猪呕吐、水样腹泻和脱水为特征。成年猪和仔猪均可感染、以仔猪感染发病最为严重，尤其在集约化养猪场，若预防不力，会造成重大损失。
通常对发生腹泻的病猪确诊需根据流行病学、临床症状和病变进行判定作出诊断。且需与猪传染性胃肠炎病毒、轮状病毒和仔猪大肠杆菌病相区别，确诊需要分离病毒或接种新生仔猪，对于生产实际当中很难普及。该团队建立的CPA诊断方法，灵敏度与RT-PCR相当；只需2-3个小时便可以判读结果；不需要离心机、PCR仪器和电泳槽等实验室仪器，只需恒温槽即可满足检测仪器的需求。该研究报告中建立的针对猪流行性腹泻病毒核酸特异性的诊断方法，为现场快速准确的诊断该病提供了很好的解决方法。
王凤雪一直致力于病毒性传染病的新型疫苗和诊断方法的研究工作，先后建立了鉴别检测猪蓝耳病和犬瘟热疫苗免疫和野毒感染的RT-PCR鉴别方法;筛选得到了针对高致病性蓝耳病疫苗株TJM-F92天然缺失的非结构蛋白2（NSP2）的单克隆抗体，为从血清学方面入手建立可用于免疫清群净化蓝耳病提供了有力的技术支撑。
原文题目：ReverseTranscriptionCross-PrimingAmplification–NucleicAcidTestStripforRapidDetectionofPorcineEpidemicDiarrheaVirus
Abstract
Porcineepidemicdiarrheavirus(PEDV)isahighlytransmissiblecoronavirusthatcausesasevereentericdiseaseparticularlyinneonatalpiglets.Inthisstudy,arapidmethodfordetectingPEDVwasdevelopedbasedoncross-primingamplificationandnucleicacidteststrip(CPA-NATS).FiveprimersspecificfortheNgenesequenceofPEDVwereusedforthecross-primingamplification.Detectionofamplificationproductsbasedonlabeledprobeprimerswasconductedwithstripbindingantibodyoflabeledmarkers.TheCPAmethodwasevaluatedand北京治疗白癜风去哪个医院最好儿童白癜风怎么引起的原因